Carga laboral y obstáculos de rendimiento del personal de enfermería en la Unidad de Cuidados Intensivos / Workload and Performance Obstacles of the Nursing Staff in the Intensive Care Unit

Introducción: La carga laboral influencia el rendimiento del personal de enfermería y guarda relación con la calidad de los cuidados brindados a los pacientes, se incrementa por condiciones dependientes del cargo ocupado por los enfermeros y en presencia de obstáculos que limiten sus funciones. Objetivo: Describir el nivel de carga laboral y obstáculos de rendimiento del personal de enfermería en una unidad de cuidados intensivos. Métodos: Estudio descriptivo de corte transversal, en unidad de cuidados intensivos del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (Mérida-Venezuela), durante junio-agosto de 2019. De 46 enfermeros se conformó una muestra de 36, se utilizó el instrumento NASA-TLX para determinar la carga laboral (se seleccionaron cuatro tareas), el cuestionario Performance Obstacles of ICU Nurses identificó los obstáculos presentes. Se usaron medidas de tendencia central (medianas, rangos intercuartílicos). La asociación estadística de datos (análisis bivariados) se aplicó la prueba chi cuadrado; la significancia estadística se consideró para p < 0,05. Resultados: El 50,00 % de los participantes son especialistas, menores de 40 años (77,76 %), del sexo femenino (88,88 %), las tareas de mayor carga laboral fueron: cuidados de vía aérea artificial (NASA-TLX mediana = 1105) y administración de medicamentos (NASA-TLX mediana = 1055), la mayoría de los obstáculos identificados pertenecen a la categoría tecnología y herramientas, la carga laboral de la tarea administración de medicamentos tiene asociación estadística con usar equipo en malas condiciones (p = 0,031) y no estaba en el lugar correspondiente (p = 0,048). Conclusiones: El personal de enfermería de la unidad de cuidados intensivos tiene alta carga laboral, influenciada por obstáculos de rendimiento(AU)

ABSTRACT Introduction: The workload influences the performance of the nursing staff and is related to the quality of the care to provide to the patients, this workload increases by conditions on the position occupied by the nurses and the presence of obstacles that limit their functions. Objective: To describe the level of workload, and performance obstacles of the nursing staff in an intensive care unit. Methods: A descriptive cross-sectional study was carried out in the intensive care unit at Los Andes Autonomous Institute University Hospital (Mérida-Venezuela), from June to August 2019. We formed a sample of 36 nurses out of 46; NASA- TLX instrument was used to determine the workload (four tasks were selected); the Performance Obstacles of ICU Nurses questionnaire identified the existing obstacles. Measures of central tendency (median, interquartile ranges) were used. The statistical association of data (bivariate analysis) was applied the chi square test; statistical significance was considered for p <0.05. Results: 50.00% of the participants were specialists. 77.76% were younger 40 years of age, and 88.88% were female. The tasks with the greatest workload were artificial airway care (NASA- Median TLX = 1105) and medication administration (NASA-TLX median = 1055). Most of the obstacles identified corresponded to the technology and tools category, the workload of the medication administration task had a statistical association with using equipment in poor condition (p = 0.031) and it was not in the proper place (p = 0.048). Conclusions: The nursing staff of the intensive care unit had high workload, influenced by performance obstacles.

Diseño de una prueba diagnóstica casera para la detección de anticuerpos tipo IgG contra el virus de la hepatitis C: incorporación de la proteína de envoltura E2 y no estructural 2 (NS2) / Design of an in-house diagnostic test for IgG antibodies against hepatitis C virus detection: Incorporation of envelope protein E2 and non-structural protein 2 ( NS2)

Durante la infección por el virus de la hepatitis C (VHC), los anticuerpos específicos aparecen varias semanas posterior a la exposición, van dirigidos contra las diversas proteínas del virus incluyendo anticuerpos contra la envoltura viral (E2)y la proteína no estructural 2 (NS2). En este trabajo se diseñó un ensayo casero de ELISA que incorpora, además de NS3, NS5a, NS5b y el core, a las proteínas E2 y NS2 del VHC en sustitución de NS4, con el fin de evaluar su capacidad diagnóstica en comparación con un estuche comercial de 4ta generación. La validación de la prueba casera demostró una especificidad y sensibilidad similar a las obtenidas con el estuche comercial de 4ta generación (Biokit©), con un índice kappa igual a 0,969, al compararse con el mismo. Esto sugiere que la prueba diseñada podría utilizarse de manera segura para la detección de anticuerpos VHC específicos de tipo IgG para el diagnóstico de la hepatitis C y constituirse como una alternativa de producción nacional más económica.

During hepatitis C (HCV) infection specific antibodies appear several weeks after exposure, including viral envelope (E2) and non-structural protein 2 ( NS2). In this work we designed an in-house ELISA assay, that incorporate beside NS3, NS5a, NS5b and core, the HCVE2 and NS2 proteins in substitution of NS4, in order to evaluate its diagnostic utility as compared to a fourth generation commercial kit. The in-house test demonstrated a specificity and sensitivity similar to those obtained with the commercial kit, with a kappa index equal to 0.969, when it was compared with the 4th generation commercial kit (BioelisaBiokit ©), suggesting that our test could be used for the diagnosis of specific IgG antibodies detection against hepatitis C and to become a more economic national alternative.

Identification of Nef-HIV-1 domains involved in p22-phox interaction and superoxide production / Identificación del dominio de Nef-VIH-1 involucrado en la interacción con p22-phox y producción de superoxido

Nef -HIV-1 has been shown to be involved in NADPH complex interaction and superoxide production. The aim of this work was to study the domains involved in the interaction between Nef and p22-phox. Two approaches were used: 1) in silico modelling, to determine the potential binding motifs and design Nef truncated forms and 2) functional assays. The results showed that GFPVT 68-72, FPDW 121-124 and REVLE 179-183 on Nef are critical for p22-phox (RPQIG 142-146 and PGGP 181-184) docking. However, only the region containing FPDW 121-124 on Nef is able to induce superoxide production. Understanding the molecular mechanisms involved in generating oxidative stress during HIV infection, is critical for therapeutic intervention, in order to minimize viral replication and dissemination.

Se ha evidenciado que Nef-VIH-1 está involucrado en la interacción con el complejo NADPH y la producción de superóxido. El objetivo de este trabajo fue identificar los dominios implicados en la interacción entre Nef y p22-phox. Se utilizaron dos estrategias: 1) análisis in silico para determinar los posibles motivos de unión y el diseño Nef formas truncadas y 2) ensayos funcionales. Los resultados mostraron que GFPVT 68-72, FPDW 121 a 124 y 179 a 183 REVLE de Nef son críticos para su unión con p22-phox (RPQIG 142-146 y 181-184 PGGP). Sin embargo, sólo la región que contiene FPDW 121-124 en Nef, es capaz de inducir la producción de superóxido. La comprensión de los mecanismos moleculares implicados en la generación de estrés oxidativo durante la infección por VIH, es crítico para la intervención terapéutica, con el fin de minimizar la replicación y la propagación viral.

Citocinas reguladoras (IL-10 y TGF-B) en pacientes con leishmaniasis cutánea Americana / Regulatory cytokines (IL-10 and TGF-B) in American cutaneous leishmaniasis patients

La leishmaniasis cutánea Americana (LCA) presenta un espectro clínico e inmunológico, donde las formas intermedias se asocian con respuestas celulares exacerbadas frente a Leishmania spp., que pueden reflejar defectos de inmunoregulación. Debido a que la IL-10 y el TGF-β son algunos de los factores importantes en modular la respuesta inmunitaria, nos propusimos establecer si existen alteraciones en su producción entre las diferentes manifestaciones de la leishmaniasis cutánea. Se estudiaron individuos con leishmaniasis cutánea: localizada (LCL n=20), mucocutánea (LCM n=14), intermedia (LCI n=20), difusa (LCD n=12) y 22 voluntarios sanos. La IL-10 se determino por citometría de flujo y el TGF-β por ELISA en muestras de plasma y en sobrenadantes de cultivos linfocitarios de pacientes y controles, estimulados "in vitro" con L. braziliensis. Se evidenció una baja producción de IL-10 en los pacientes con LCI respecto a los LCM y LCD. Mientras que en plasma, no se observaron variaciones en la concentración de esta citocina entre los diferentes grupos. En contraste, el TGF-β estuvo incrementado significativamente en concentración y frecuencia de individuos respondedores en todos los grupos de pacientes respecto a los controles, siendo más elevado en los pacientes LCM asociado con un Odds Ratio muy elevado (87). Luego de estimulación con L. braziliensis, los pacientes con LCM continúan mostrando una mayor producción de TGF-β que los pacientes con LCI y LCD. En general, nuestros resultados sugieren que la IL-10 y el TGF-β pudiesen estar mediando supresión en los pacientes con LCD y una inadecuada inmunoregulación en los pacientes con LCI por el escaso nivel de estas. En los pacientes LCM, ambas citocinas fallan en modular la respuesta exacerbada presente en ellos. Otros mecanismos de regulación deben de ser investigados en futuros estudios.

American cutaneous Leishmaniasis shows a clinical and immunological spectrum, where intermediate forms are associated with exacerbated cell responses against Leishmania spp., which may reflect defective immunoregulation. Since IL-10 and TGF-β modulate the immune response, we aimed to establish whether there are changes in its production between the different manifestations of cutaneous leishmaniasis. We studied individuals with cutaneous leishmaniasis: localized (LCL n = 20), mucocutaneous (MCL n = 14), intermediate (ICL n = 14), diffuse (LCD n = 12) and twenty two healthy subjects. The IL-10 was determined by flow cytometry and TGF-β by ELISA in plasma and in supernatants of lymphocyte cultures from patients and controls stimulated in vitro with L. braziliensis. The results showed a low production of IL-10 in patients with intermediate or chronic leishmaniasis compared to MCL and DCL patients. There were no changes in plasma concentration of this cytokine among the different groups. In contrast, the TGF-ß was significantly increased in concentration and frequency of respondents in all groups of patients compared to controls, being higher in MCL patients associated with an elevated odds ratio (87). After stimulation with L. braziliensis, the MCL patients continue to show increased production of TGF-β compared to ICL and LCD patients. Overall, our results suggest that IL-10 and TGF-β could be mediating suppression in DCL patients and an inadequate or defective regulation in ICL patients by the low level of these cytokines. In MCL patients, both cytokines fail to modulate their exacerbated response. Other regulatory mechanisms must be investigated in future studies.

Estandarización de la prueba aglutinación directa empleando antígenos autóctonos para el diagnóstico de la leishmaniasis visceral en zonas endémicas de Venezuela / Standardization of direct agglutination test using native antigens for diagnosis of visceral leishmaniasis endemic areas of Venezuela

La leishmaniasis visceral es la manifestación clínica más severa de la leishmaniasis ya que puede ser fatal si no se administra el tratamiento adecuado. En Venezuela el foco mas activo es la isla de Margarita, donde principalmente se ven afectados niños de 0 a 9 años. De ahí la importancia de un diagnostico temprano, a menudo difícil en las áreas endémicas. Si bien la prueba de oro para el diagnostico de leishmaniasis visceral es la detección directa de los parásitos, la toma de muestra es bastante invasiva e incomoda para el paciente. Más aún, la mayoría de estas técnicas son costosas, complejas y de larga ejecución. Otros métodos indirectos, como la ELISA (usando antígenos crudos o definidos del parásito) requieren de equipos y personal especializados; lo cual es difícil de cubrir en las zonas endémicas. Recientemente validamos en Venezuela, el uso de una técnica de aglutinación directa (KIT Biomedical Research) evidenciándose una elevada sensibilidad y especificidad. El antígeno empleado en esta prueba es Leishmania donovani. Sin embargo, en nuestro país el agente causal de esta parasitosis es Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi). Otro aspecto a considerar es la variación antigénica regional que sufre un parásito al interactuar con el vector local y con factores del hospedero; además del costo; por lo tanto desarrollamos una prueba de aglutinación directa un antígeno de L. infantum (syn. L. chagasi) obtenido de perros de la isla de Margarita. Éste se comparó con la prueba comercial, ensayando sueros de pacientes de leishmaniasis visceral confirmados y controles. Empleando como patrón de oro el ELISA con rK39, obtuvimos en ambos una sensibilidad del 100%; y una especificidad del 82,85 % para la prueba comercial y 98,78% para el nuestro, lo cual pone en manifiesto la relación específica entre los anticuerpos de pacientes venezolanos y el antígeno predominante del país

Visceral leishmaniasis is the most severe form of leishmaniasis, and it is deadly if left untreated. Margarita Island is the most active visceral leishmaniasis focus in Venezuela, where most of the affected population are children between 0 to 9 years old. Therefore, an early diagnosis is very important, unfortunately, this is difficult in endemic areas. Although, the gold standard method for visceral leishmaniasis diagnosis is parasite detection; the sample retrieval is very inconvenient for patients. Moreover, most techniques are time-consuming, expensive and difficult to carry out. Other indirect methods, such as ELISA (using crude or define Leishmania antigens), require specialised technicians and equipment, which is unsuitable in the field areas.Recently we validated the performance of a direct agglutination test for the diagnosis of visceral leishmaniasis in Venezuela (KIT Biomedical Research). It showed elevated sensitivity and specificity. Nevertheless, this test includes Leishmania donovani as antigen, whereas visceral leishmaniasis in our country is caused by Leishmania infantum (= L. chagasi). Moreover, parasite antigenic variation as a result of vector-parasite and host-parasite interaction is an important factor to be considered; in addition to the costs. Therefore, we developed a direct agglutination test using L. infantum (syn. L. chagasi) isolated from a naturally infected dog of Margarita Island. This was compared to the available commercial kit, and testing confirmed visceral leishmaniasis patients and healthy controls. Using rK39 ELISA as gold standard, it was found 100% sensitivity for both tests, and 82.85 % specificity for the commercial test and 98.78% for the local one, which shows the relationship between dominant local antigens and antibody’s specificity displayed by Venezuelan patients

Herramientas no invasivas en Venezuela: comparación entre las pruebas inmunoserológicas DAT, rK26 y rK39 en el diagnóstico de leishmaniasis visceral / Non invasive diagnostic tools for visceral leishmaniasis: a comparison of the immunoserological tests DAT, rK26 and rK39

Introducción. La leishmaniasis visceral constituye un problema de salud pública en los países en donde es endémica por ser potencialmente letal, principalmente en niños. El diagnóstico rápido es importante en el control de la enfermedad. Objetivo. Comparar las pruebas inmunocromatográficas rK39 (rK39 dipstick, Kalazar detect test, Inbios Internacional Inc.), ELISA rK26 y la prueba de aglutinación directa (Kit Biomedical Research) en relación con la prueba de ELISA rK39, como herramientas serodiagnósticas para la leishmaniasis visceral en Venezuela.Materiales y métodos. Se estudiaron 50 muestras séricas de pacientes positivos por la prueba ELISA rK39, provenientes de diferentes zonas endémicas: Nueva Esparta, Lara, Anzoátegui y Trujillo; se incluyeron 17 muestras de voluntarios sanos y 25 de pacientes con otras enfermedades. Se utilizó la prueba ELISA rK39 como método de referencia, considerándola como patrón de referencia imperfecto, a partir del cual se determinaron los valores de sensibilidad, especificidad, razón de verosimilitud y valores diagnóstico positivo y negativo en las demás pruebas evaluadas. Resultados. Todas las pruebas mostraron una fuerte correlación (p<0,0001) con la ELISA rK39. La aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron altos valores de sensibilidad, 89,74% (IC95% 81,34-98,15) y 94,15% (IC95% 87,65-100), respectivamente, y de especificidad, 81% (IC95% 79,96-99,51) y 100% (IC95% 100-100). La prueba ELISA rK26, a pesar de poseer buena especificidad, 99% (IC95% 95,17-100), tuvo baja sensibilidad, 37% (IC95% 23,41-50,15). Conclusión. Las pruebas de aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron los mayores valores de sensibilidad y especificidad. Ambas son simples, económicas y fácilmente aplicables. Por ello, son recomendables para efectuar un diagnóstico de leishmaniasis visceral eficaz y precoz en Venezuela.

Introduction. Human visceral leishmaniasis is a serious public health problem in endemic countries because of its high potential lethality, particularly in children. Rapid diagnosis is essential to early treatment and control of visceral leishmaniasis.Objective. The aim was to compare three serodiagnostic tools for human visceral leishmaniasis. Materials and methods. Three methods were compared: the rK39 dipstick (Kalazar detection test, Inbios International Inc.), ELISA rK26 and direct agglutination test (DAT) (KIT Biomedical Research). Fifty serum samples from patients positive for rK39 ELISA were compared from four endemic provinces in Venezuela: Nueva Esparta (Margarita island), Lara, Anzoátegui and Trujillo. Additional serum samples from 17 healthy volunteers and 25 patients with other diseases were included. The rK39 ELISA served as the baseline standard method. Sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and likelihood ratio were calculated for each test. Results. All methods had a positive correlation with rK39 ELISA (p<0.0001). They showed high sensitivity and specificity. The direct agglutination test and the rK39 dipstick showed high sensitivity values, 89.7% (95% CI: 81.34.0-98.2%) and 94.2% (95% CI: 87.7-100%), respectively, and high specificity, 81.0% (95% CI: 80.0-99.5%) and 100%. The rK26 ELISA showed good specificity, 99% (95% CI: 95.2-100%), but a very low sensitivity, 37% (95% CI: 23.4-50.2%). Conclusion. Overall results indicated that DAT and rK39 dipstick have the highest specificity and sensitivity. Both are simple, cost-effective and field applicable tests. Therefore, they are recommended for early and accurate diagnosis of visceral leishmaniasis.

Evaluación de una prueba de aglutinación directa como método alternativo para el diagnóstico de leishmaniasis visceral canina y humana en Venezuela / The direct agglutination test as an alternative method for the diagnosis of canine and human visceral leishmaniasis

Introduction. Visceral leishmaniasis is the most severe clinical form of leishmaniasis and is often fatal without proper treatment. Therefore, early and accurate diagnosis is important, but often difficult in endemic areas. Objective. The aim was to evaluate a direct agglutination test as a potential visceral leishmaniasis diagnostic method in endemic areas of Venezuela Materials and methods. The performance of the direct agglutination test, based on freezedried Leishmania donovani antigen was evaluated under laboratory conditions using serum samples of humans and dogs from several Venezuelan visceral leishmaniasis endemic areas: Nueva Esparta (Margarita Island), Lara, Anzoátegui and Trujillo Status. The study included confirmed visceral leishmaniasis patients (n=30), visceral leishmaniasis suspected subjects (n=4), healthy controls (n=19) and patients with other confirmed diseases (n=20). In addition, 24 serum samples from dogs with confirmed visceral leishmaniasis and 18 healthy control dogs were tested. Results. All serum samples of visceral leishmaniasis patients, either active or recovered, were positive. They showed anti- L. donovani titers above 1:1600. Three out of four suspected visceral leishmaniasis cases were also positive, while serum samples from endemic controls and patients with other diseases had titers lower than 1:800. A sensitivity of 100 percent was obtained for all threshold levels under consideration and 100 percent specificity at the threshold titer of 1:800 (95 percent confidence interval: 91-100 percent). A 93 percent sensitivity (95 percent confidence interval: 76-99 percent) was observed in dog samples, with 100 percent specificity (95 percent confidence interval: 79-100 percent) at the threshold titer of 1:200. Conclusion. The direct agglutination test seems suitable for use in epidemiological studies and for serological diagnosis of human visceral leishmaniasis and canine visceral leishmaniasis.

Introducción. La leishmaniasis visceral es la forma clínica más grave de la leishmaniasis. Ésta puede ser fatal si no se administra el tratamiento adecuado. Por ello, el diagnostico temprano es importante, pero a menudo difícil, en las áreas endémicas. Objetivo. Evaluar el potencial de la prueba de aglutinación directa como un método para el diagnóstico de leishmaniasis visceral en zonas endémicas de Venezuela. Materiales y métodos. La efectividad de la prueba de aglutinación directa con el antígeno congelación-descongelación de Leishmania donovani fue evaluada bajo condiciones de laboratorio usando muestras de sueros de humanos y perros provenientes de diferentes regiones endémicas de leishmaniasis visceral de Venezuela: Nueva Esparta (Isla de Margarita), Estados Lara, Anzoátegui y Trujillo. Se incluyeron pacientes con diagnóstico confirmado de leishmaniasis visceral (n=30), sospecha de leishmaniasis visceral (n=4), voluntarios sanos (n=19) y pacientes con otras enfermedades (n=20). Además, se evaluaron 24 muestras de suero de perros con leishmaniasis visceral y 18 controles. Resultados. Todas las muestras de los pacientes con leishmaniasis visceral activa o curada fueron positivas. Mostraron títulos anti-L. donovani por encima de 1:1.600. Tres de cuatro casos con sospecha de leishmaniasis visceral también resultaron positivos a la prueba, mientras que los sueros controles y los de los pacientes con otras patologías dieron títulos por debajo de 1:800. Se obtuvo una sensibilidad de 100% a todos los puntos de corte considerados y una especificidad de 100% al punto de corte de 1:800 (intervalo de confianza de 95%, IC95%: 90,97%-100%). Las muestras de perros mostraron una sensibilidad de 92,59% (IC95%: 75,69%- 99,09%) y 100% de especificidad (IC95%: 79,42%-100%) al punto de corte de 1:200. Conclusión. En general, nuestros resultados indican que el uso de la prueba de aglutinación directa es apropiado para la realización de estudios epidemiológicos y para el...